Bci T130 I (EcoR II, Mva I) A

This product is for research use only. ... not use this product as food, cosmetic, or household item, etc. Taara products may not be resold or transfe...

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Bci T130 I (Eco R II, Mva I) Code No. 1232A Size : 2,000 units

( AT ) G G T G G( ) C C A C C

Shipping at - 20℃ Store at - 20℃

Supplied Reagents : 10X K Buffer 10X Loading Buffer Conc. : Volume :

1 ml 1 ml 10 units/μl 200 μl

10 mM 100 mM 0.1 mM 1 mM 0.15% 10 mM 0.01% 50%

Storage Buffer :

Number of Cleavage Sites in DNA : λ 70

SV 40 17

φX 174 2

pBR 322 6

pUC 19 5

pUC 119 5

M13 mp18 7

Col E1 14

Star Activity : Unrelated site may often be cut in the presence of high concentration of glycerol or DMSO. Effect of DNA Methylation : Enzyme activity is not affected by dcm methylase. Inactivation Treatment : Heat treatment (70℃, 15 min.) is not sufficient to inactivate this enzyme completely. It is necessary to inactivate this enzyme by ethanol precipitation treatment (or phenol treatment - ethanol precipitation treatment).

Tris-HCl, pH7.5 NaCl EDTA DTT Triton X-100 MgCl2 BSA Glycerol

Ligation-Recutting Test : After digestion with this enzyme, the ligation is inefficient under the influence of the structure of Bci T130 I fragment ends. For ligation, the overnight ligation using DNA Ligation Kit Ver.2.1 is recommended. Compositions of Universal Buffer (Stored at -20℃) : 1. 10X L

Source : Bacillus circulans T130

2. 10X M

General Reaction Mixture : Bci T130 I 10X K Buffer Substrate DNA Sterilized distilled water

Ad2 136

1 μl 2 μl ≦ 1 μg up to 20 μl

3. 10X H

Reaction Temperature : 37℃ Unit definition : One unit is defined as the amount of this enzyme required to digest completely 1 μg ofλDNA in 50 μl of the reaction mixture at 37℃ for 1 hr. Quality Control : Please see the Certificate of Analysis (CoA; supplied with the product) for each lot. You can also download the CoA from “Support” > “Certificates of Analysis” on TAKARA BIO website. (URL: http://www.takara-bio.com/research.htm)

100 mM 100 mM 10 mM 100 mM 100 mM 10 mM 500 mM 500 mM 100 mM 10 mM 1,000 mM

Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol NaCl Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol NaCl

4. 10X K

200 mM Tris-HCl, pH8.5 100 mM MgCl2 10 mM Dithiothreitol 1,000 mM KCl 5. 10X T 330 mM Tris-Ac, pH7.9 (BSA-free) 100 mM Mg-Ac 5 mM Dithiothreitol 660 mM K-Ac 6. 0.1% BSA 7. 0.1% Triton X-100

Compositions of 10X Loading Buffer (Stored at RT after used) : 0.9% SDS 50% Glycerol 0.05% Bromophenol Blue Add >1/10 volume of 10X Loading Buffer to stop enzyme reaction and apply on agarose gel electrophoresis. SDS may precipitate during the storage at room temperature. In case precipitates generated, dissolve in warm bath before use.

Relative Activity in TaKaRa's Universal Buffers : Universal Buffer Relative Activity (%)

L (<20)

M (20)

H 80

K 100

T (+BSA) (20)

( ) : Weak star activity is detected. Ionic Effect on Activity in Basal Buffer : Salt (mM) NaCl (%) KCl (%)

0 60 60

50 80 60

80 100 100

100 80 100

125 80 60

150 80 60

Composition of Basal BufferI : 20 mM Tris-HCl, pH8.5 10 mM MgCl2 80 mM NaCl 1 mM DTT

175 60 60

Note This product is for research use only. It is not intended for use in therapeutic or diagnostic procedures for humans or animals. Also, do not use this product as food, cosmetic, or household item, etc. Takara products may not be resold or transferred, modified for resale or transfer, or used to manufacture commercial products without written approval from TAKARA BIO INC. If you require licenses for other use, please contact us by phone at +81 77 565 6973 or from our website at www.takara-bio.com. Your use of this product is also subject to compliance with any applicable licensing requirements described on the product web page. It is your responsibility to review, understand and adhere to any restrictions imposed by such statements. All trademarks are the property of their respective owners. Certain trademarks may not be registered in all jurisdictions. v201409Da_201607

Takara Bio Inc. website : http://www.takara-bio.com

Bci T130 I (Eco R II, Mva I) Code No. 1232A Size:2,000 units

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添付試薬: 10×K Buffer 10×Loading Buffer

1 ml 1 ml

● Basal Buffer での塩濃度の影響 塩濃度 (mM) 相対活性 NaCl (%) 相対活性 KCl (%)

Basal Buffer 組成 20 mM 10 mM 80 mM 1 mM



10 units/μl 200 μl

50 80 60

80 100 100

100 80 100

125 80 60

150 80 60

175 60 60

Tris-HCl, pH8.5 MgCl2 NaCl DTT

●各種 DNA の切断数 λ 70

濃度: 容量:

0 60 60

Ad2 136

SV 40 17

φX 174 2

pBR 322 6

pUC 19 5

pUC 119 5

M13 mp18 7

Col E1 14

● Star 活性 高濃度グリセロール存在、DMSO 存在下では、認識配列がゆるむことが ある。 ●メチル化の影響 dcm methylase の影響を受けない。 ● 失活条件 本酵素は、熱処理(70℃、15 分)では完全に失活しない。反応後、酵素 を完全失活させるためには、エタノール沈殿(またはフェノール処理後、 エタノール沈殿)を行う。

●形状

10 mM 100 mM 0.1 mM 1 mM 0.15% 10 mM 0.01% 50%

●起源

Tris-HCl, pH7.5 NaCl EDTA DTT Triton X-100 MgCl2 ウシ血清アルブミン Glycerol

● Universal Buffer 組成(- 20℃保存) 1. 10×L

100 mM 100 mM 10 mM 2. 10×M 100 mM 100 mM 10 mM 500 mM 3. 10×H 500 mM 100 mM 10 mM 1,000 mM

Bacillus circulans T130

●一般的な反応液 Bci T130 I 10×K Buffer 基質 DNA 滅菌蒸留水 ●反応温度

● Ligation-Recutting Test 本酵素で切断した DNA フラグメントは、その末端塩基配列の影響でライ ゲーション効率が低くなる。ライゲーション反応には、DNA Ligation Kit Ver.2.1 を用いた長時間反応を推奨する。

1 μl 2 μl ≦ 1 μg up to 20 μl

37℃

●活性の定義 反応液 50 μl 中、37℃で 1 時間に 1 μg のλDNA を完全に分解する酵 素活性を 1 U とする。 ●純度検定 純度検定については、各ロットの Certificate of Analysis (CoA;製品に添付) をご覧ください。CoA はタカラバイオウェブサイトのドキュメントセン ターでもダウンロードできます。 (URL: http://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.php) ● Universal Buffer の相対活性 相対活性(%)

L (<20)

M (20)

H 80

( ):スター活性が出現しやすい。

K 100

T (+BSA) (20)

Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol NaCl Tris-HCl, pH7.5 MgCl2 Dithiothreitol NaCl

4. 10×K

200 mM Tris-HCl, pH8.5 100 mM MgCl2 10 mM Dithiothreitol 1,000 mM KCl 5. 10×T 330 mM Tris-Ac, pH7.9 (BSA-free) 100 mM Mg-Ac 5 mM Dithiothreitol 660 mM K-Ac 6. 0.1% BSA 7. 0.1% Triton X-100

● 10×Loading Buffer 組成(開封後、室温保存) 0.9% SDS 50% Glycerol 0.05% Bromophenol Blue 反応液量の 1/10 量以上の 10×Loading Buffer を添加し、酵素反応を止め、 アガロースゲルにアプライしてください。また、保存中に SDS が析出す ることがありますが、温浴で溶解してお使いください。 ● 注意 本製品は研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床 診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家 庭用品等として使用しないでください。 タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための 改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。 ライセンスに関する情報は弊社ウェブカタログをご覧ください。 本データシートに記載されている会社名および商品名などは、各社の 商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有 者に帰属します。 v201409Da_201607

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